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Title : 광합성 색소의 분리
예비레포트
서론
1. 광합성 색소
광합성은 엽록체라 불리는 식물의 특수한 기관에서 수행된다. 엽록체의 thylakoid membrane에는 빛 에너지를 흡수하는 광합성 색소들이 분포되어있으며, 주요 광합성 색소들로는 chlorophyll a, chlorophyll b, carotenoid 등이 있다. 엽록소(chlorophyll)는 빛 에너지를 흡수하는 주 색소이나, 보조색소(carotenoid) 역시 빛을 흡수하고 에너지를 엽록소에 전달시켜 준다. 보조 색소를 이루는 것들로는 β-carotene, xanthophyll, phycocyanin 및 phycoerythrine등이 있다. 광합성 색소들은 대부분 지용성 분자들로써 여러 가지 유기 용매에 녹는 정도가 다양하며, 각기 특정한 파장의 빛을 흡수한다.
2. Paper Chromatography
Chromatograghy는 혼합물의 분리 분석, 화합물의 정제, 분자량의 측정 등에 사용되는 기술이다. Chromatograghy는 고정상과 이동상으로 구성된다. Paper chromatography에서는 여과지 표면에 흡착되어 있는 물이 고정상이며 전개액으로 사용되는 유기용매가 이동상이 된다. Acetone에 녹아있는 색소 혼합물은 모세관현상에 의해 전개액을 따라 여과지를 이동할 때 물(고정상)과 전개액(이동상)에 녹는 비에 따라 이동 속도에 차이가 난다. 결국 색소 혼합물에 들어있던 색소들은 이동속도의 차이에 의해 서로 분리 된다.
실험의 목적
종이 크로마토그래피를 이용해 잎에서 색소를 분리하고 각 색소의 최대흡수 파장을 알아본다.
실험 기구 및 재료
시금치 잎, 여과지(3MM), 모세유리관(또는 microtip), 막자사발, 전개액(페트롤리움에테르:아세톤=9:1),
아세톤, 시험관, spectrophotometer, 헤어드라이어, cuvette, pipette, polyglove
실험 방법
1. 광합성 색소의 분리
① 일정량의 시금치 잎을 아세톤 5ml에 넣고 막자사발로 곱게 간다
② 위의 추출물을 원심분리하여(2000rpm, 5분) 상등액을 따로 취한다
③ 여과지를 15cm 2cm 의 크기로 자른다. 아래그림과 같이 한쪽 끝에서 1cm 되는 곳을 잘라 삼각형을 만들고 이곳으로부터 2cm 되는 곳에 연필로 선을 긋는다 (이때 여과지를 손으로 만지지 않도록 주의한다)
④ 모세관 또는 microtip을 이용하여 준비된 엽록소 추출액을 연필로 그은 선 중앙에 점적한다. 이때 점적한 부분이 가능한 작은 원이 되도록 한다. 헤어 드라이어를 사용하여 완전히 말리고 다시 점적 하기를…(생략)
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